Evaluation of Factors That Influence Dose Variability of Marek's Disease Vaccines.

Marek's disease (MD) vaccines are cell-associated and require special handling and care during administration. Vaccine dose is evaluated by plaque assay and is indicated as the number of plaque-forming units (PFUs) per dose. The objectives of this study were to evaluate the dose variability within each vial of MD vaccines and to assess those factors (from both manufacturing and handling and administration of the vaccine) that could affect vaccine dose variability. Three experiments were conducted. Experiment 1 was to evaluate dose variability in 36 MD vaccine vials and the effect of manufacturing factors on dose variability. Vaccines were titrated 10 times. Dose variability was measured as the coefficient of variability (CV) calculated as standard deviation divided by average PFU and multiplied by 100. Our results showed that all evaluated vaccines had levels of CV ranging from 10% to 34%. Variability existed regardless of manufacturer, vaccine serotype, and batch. Experiment 2 was conducted to evaluate the effect of infectivity rate (IR) on CV. IR was artificially reduced by adding noninfected chicken embryo fibroblast to the reconstituted vaccine before titration. Our results showed that decreased IR results in higher CV. Experiment 3 was to evaluate the handling and administration factors (time and mixing during administration) on CV. Our results showed that CV tends to increase with time and that this effect is more remarkable if vaccines were not mixed. Our study emphasizes the relevance of proper handling of MD vaccines and shows that dose variability can jeopardize the uniformity of vaccination in a flock and therefore the success of vaccination. Evaluación de factores que influyen en la variabilidad de las dosis de las vacunas contra la enfermedad de Marek. Las vacunas contra la enfermedad de Marek (MD) están asociadas a células y requieren un manejo y cuidado especiales durante la administración. La dosis de la vacuna se evalúa mediante un ensayo de placa y se indica como el número de unidades formadoras de placa (UFP) por dosis. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la variabilidad de la dosis dentro de cada vial de vacunas contra la enfermedad de Marek y evaluar los factores (tanto de fabricación como de manipulación/administración de la vacuna) que podrían afectar la variabilidad de la dosis de la vacuna. Se realizaron tres experimentos. El experimento número 1 consistió en evaluar la variabilidad de la dosis en 36 viales de vacuna de Marek y el efecto de los factores de fabricación en la variabilidad de la dosis. Las vacunas fueron tituladas 10 veces. La variabilidad de la dosis se midió como el coeficiente de variación (CV) calculado como desviación estándar dividido por las UFP promedio y multiplicado por 100. Nuestros resultados mostraron que todas las vacunas evaluadas tenían coeficientes de variación que variaban del 10% al 34%. La variabilidad existía independientemente del fabricante, el serotipo de la vacuna y el lote. El experimento número 2 se realizó para evaluar el efecto de la tasa de infectividad (IR) en el coeficiente de variación. La tasa de infectividad se redujo artificialmente mediante la adición de fibroblastos de embrión de pollo no infectados a la vacuna reconstituida antes de la valoración. Los resultados mostraron que la disminución en la tasa de infectividad resulta en mayores coeficientes de variación. El experimento número 3 consistió en evaluar los factores de manipulación y administración (tiempo y mezclado durante la administración) sobre los coeficientes de variación. Nuestros resultados mostraron que el coeficiente de variación tiende a aumentar con el tiempo y que este efecto es más notable si las vacunas no se mezclan. Este estudio enfatiza la relevancia del manejo adecuado de las vacunas contra la enfermedad de Marek y muestra que la variabilidad de la dosis puede poner en peligro la uniformidad de la vacunación en una parvada y por lo tanto el éxito de la vacunación.