Can the SCD test and terminal uridine nick-end labeling by flow cytometry technique (TUNEL/FCM) be used interchangeably to measure sperm DNA damage in routine laboratory practice?
Andrology laboratory
DNA damage
Flow cytometry
Sperm chromatin dispersion test
Spermatozoa
TUNEL
Journal
Basic and clinical andrology
ISSN: 2051-4190
Titre abrégé: Basic Clin Androl
Pays: England
ID NLM: 101640161
Informations de publication
Date de publication:
2019
2019
Historique:
received:
10
07
2019
accepted:
18
12
2019
entrez:
1
1
2020
pubmed:
1
1
2020
medline:
1
1
2020
Statut:
epublish
Résumé
Numerous tests have been proposed to evaluate sperm DNA integrity. To assess the sperm chromatin dispersion (SCD) test in an andrology laboratory, twenty-five men attending Clermont-Ferrand (France) University Hospital's Center for Reproductive Medicine were recruited. Sperm DNA damage was measured in the same semen samples using the SCD test and the Terminal Uridine Nick-end Labeling by flow cytometry technique (TUNEL/FCM) after density gradient centrifugation. SCD test reliability between readings, readers or slides was clearly established with very high agreement between measurements (Intraclass correlation coefficient (ICC) at 0.97, 0.95 and 0.98 respectively). Despite very good agreement between the SCD test and TUNEL/FCM (ICC at 0.94), the SCD test tended to slightly but significantly underestimate DNA damage compared with TUNEL ( Andrology laboratories using the SCD test to measure sperm DNA damage need to know that it appears to give slightly underestimated measurements compared to TUNEL/FCM. However, this systematic underestimation is very small in amplitude. Both techniques give almost perfectly congruent results. Our study underlines the importance for each laboratory to validate its method to assess sperm DNA damage before implementing it in routine andrology lab practice. Plusieurs tests sont disponibles pour évaluer l’intégrité de l’ADN spermatique. Afin d’évaluer l’applicabilité de la technique de dispersion de la chromatine spermatique (SCD) dans un laboratoire d’andrologie, nous avons recruté 25 patients pris en charge au Centre de Médecine de la Reproduction du centre hospitalo-universitaire de Clermont-Ferrand (France). L’altération de l’ADN spermatique a été mesurée en ayant recours au test SCD et au test Terminal Uridine Nick-end Labeling en cytométrie en flux (TUNEL/CMF) dans les mêmes échantillons pour les deux techniques, après avoir réalisé un gradient de densité. Pour le test SCD, la concordance entre les lectures, les lecteurs et les lames a été clairement établie avec un accord quasiment parfait entre les mesures (Coefficient de corrélation intra-classe (CCI) respectivement à 0,97, 0,95 et 0,98). Malgré une bonne concordance entre le test SCD et le test TUNEL/CMF (CCI à 0,94), le test SCD tend à sous-estimer légèrement mais de façon significative l’altération de l’ADN spermatique en comparaison avec le test TUNEL ( les laboratoires d’andrologie utilisant le test SCD pour mesurer l’altération de l’ADN spermatique doivent savoir qu’il donne apparemment des valeurs légèrement sous-estimées en comparaison du test TUNEL/CMF. Cependant, cette sous-estimation systématique est. de faible amplitude et les deux techniques donnent des résultats presque parfaitement concordants dans notre étude. Cette dernière montre bien que chaque laboratoire doit valider sa méthode sur site pour évaluer l’altération de l’ADN spermatique avant de le mettre en place en pratique quotidienne en andrologie.
Sections du résumé
BACKGROUND
BACKGROUND
Numerous tests have been proposed to evaluate sperm DNA integrity. To assess the sperm chromatin dispersion (SCD) test in an andrology laboratory, twenty-five men attending Clermont-Ferrand (France) University Hospital's Center for Reproductive Medicine were recruited. Sperm DNA damage was measured in the same semen samples using the SCD test and the Terminal Uridine Nick-end Labeling by flow cytometry technique (TUNEL/FCM) after density gradient centrifugation.
RESULTS
RESULTS
SCD test reliability between readings, readers or slides was clearly established with very high agreement between measurements (Intraclass correlation coefficient (ICC) at 0.97, 0.95 and 0.98 respectively). Despite very good agreement between the SCD test and TUNEL/FCM (ICC at 0.94), the SCD test tended to slightly but significantly underestimate DNA damage compared with TUNEL (
CONCLUSIONS
CONCLUSIONS
Andrology laboratories using the SCD test to measure sperm DNA damage need to know that it appears to give slightly underestimated measurements compared to TUNEL/FCM. However, this systematic underestimation is very small in amplitude. Both techniques give almost perfectly congruent results. Our study underlines the importance for each laboratory to validate its method to assess sperm DNA damage before implementing it in routine andrology lab practice.
CONTEXTE
BACKGROUND
Plusieurs tests sont disponibles pour évaluer l’intégrité de l’ADN spermatique. Afin d’évaluer l’applicabilité de la technique de dispersion de la chromatine spermatique (SCD) dans un laboratoire d’andrologie, nous avons recruté 25 patients pris en charge au Centre de Médecine de la Reproduction du centre hospitalo-universitaire de Clermont-Ferrand (France). L’altération de l’ADN spermatique a été mesurée en ayant recours au test SCD et au test Terminal Uridine Nick-end Labeling en cytométrie en flux (TUNEL/CMF) dans les mêmes échantillons pour les deux techniques, après avoir réalisé un gradient de densité.
RÉSULTATS
UNASSIGNED
Pour le test SCD, la concordance entre les lectures, les lecteurs et les lames a été clairement établie avec un accord quasiment parfait entre les mesures (Coefficient de corrélation intra-classe (CCI) respectivement à 0,97, 0,95 et 0,98). Malgré une bonne concordance entre le test SCD et le test TUNEL/CMF (CCI à 0,94), le test SCD tend à sous-estimer légèrement mais de façon significative l’altération de l’ADN spermatique en comparaison avec le test TUNEL (
CONCLUSIONS
CONCLUSIONS
les laboratoires d’andrologie utilisant le test SCD pour mesurer l’altération de l’ADN spermatique doivent savoir qu’il donne apparemment des valeurs légèrement sous-estimées en comparaison du test TUNEL/CMF. Cependant, cette sous-estimation systématique est. de faible amplitude et les deux techniques donnent des résultats presque parfaitement concordants dans notre étude. Cette dernière montre bien que chaque laboratoire doit valider sa méthode sur site pour évaluer l’altération de l’ADN spermatique avant de le mettre en place en pratique quotidienne en andrologie.
Autres résumés
Type: Publisher
(fre)
Plusieurs tests sont disponibles pour évaluer l’intégrité de l’ADN spermatique. Afin d’évaluer l’applicabilité de la technique de dispersion de la chromatine spermatique (SCD) dans un laboratoire d’andrologie, nous avons recruté 25 patients pris en charge au Centre de Médecine de la Reproduction du centre hospitalo-universitaire de Clermont-Ferrand (France). L’altération de l’ADN spermatique a été mesurée en ayant recours au test SCD et au test Terminal Uridine Nick-end Labeling en cytométrie en flux (TUNEL/CMF) dans les mêmes échantillons pour les deux techniques, après avoir réalisé un gradient de densité.
Identifiants
pubmed: 31890218
doi: 10.1186/s12610-019-0098-2
pii: 98
pmc: PMC6933933
doi:
Types de publication
Journal Article
Langues
eng
Pagination
17Informations de copyright
© The Author(s). 2019.
Déclaration de conflit d'intérêts
Competing interestsThe authors declare that they have no competing interests.
Références
Lancet. 1986 Feb 8;1(8476):307-10
pubmed: 2868172
Fertil Steril. 2008 Nov;90(5):1792-9
pubmed: 18166175
Fertil Steril. 2008 Sep;90(3):889-90
pubmed: 17481620
Fertil Steril. 2010 Jan;93(1):159-66
pubmed: 19027111
Hum Reprod. 2016 Jan;31(1):10-23
pubmed: 26472152
Fertil Steril. 2014 Sep;102(3):667-674.e3
pubmed: 25044088
Fertil Steril. 2010 Mar 1;93(4):1027-36
pubmed: 20080235
Hum Reprod. 2013 Aug;28(8):2045-57
pubmed: 23760160
Reprod Biomed Online. 2011 Jan;22(1):37-43
pubmed: 21115273
Fertil Steril. 2005 Oct;84(4):846-9
pubmed: 16213832
Andrology. 2013 Sep;1(5):715-22
pubmed: 23843251
Reprod Toxicol. 2007 Jan;23(1):55-62
pubmed: 17049205
Adv Exp Med Biol. 2003;518:253-68
pubmed: 12817694
Fertil Steril. 2000 Jan;73(1):43-50
pubmed: 10632410
Psychol Bull. 1979 Mar;86(2):420-8
pubmed: 18839484
Hum Reprod. 2002 May;17(5):1266-73
pubmed: 11980750
Andrology. 2014 May;2(3):394-401
pubmed: 24700807
J Androl. 2012 Nov-Dec;33(6):1096-106
pubmed: 22879525
Fertil Steril. 2013 Mar 1;99(3):673-7
pubmed: 23391408
Fertil Steril. 2014 Oct;102(4):998-1005.e8
pubmed: 25190048
Curr Opin Obstet Gynecol. 2012 Jun;24(3):172-9
pubmed: 22366964
Fertil Steril. 2014 Jan;101(1):58-63.e3
pubmed: 24140035
Reprod Biomed Online. 2015 Feb;30(2):120-7
pubmed: 25530036
J Clin Diagn Res. 2012 Nov;6(9):1451-3
pubmed: 23285427
Reprod Biomed Online. 2003 Oct-Nov;7(4):428-32
pubmed: 14656403
Transl Androl Urol. 2017 Sep;6(Suppl 4):S495-S500
pubmed: 29082168
Hum Reprod. 2004 Oct;19(10):2277-82
pubmed: 15271869
Int J Androl. 2009 Jun;32(3):265-73
pubmed: 18070046
Fertil Steril. 2007 Jan;87(1):93-100
pubmed: 17074327
Andrology. 2014 May;2(3):322-5
pubmed: 24520005
Fertil Steril. 1999 Sep;72(3):496-9
pubmed: 10519622
Fertil Steril. 2005 Oct;84(4):833-42
pubmed: 16213830
Reprod Biomed Online. 2006 Jun;12(6):715-21
pubmed: 16792847
Cytometry A. 2007 Dec;71(12):1011-8
pubmed: 17972316
Fertil Steril. 2010 Aug;94(3):1027-32
pubmed: 19505686
Hum Reprod. 2005 Dec;20(12):3446-51
pubmed: 16085665
J Androl. 2003 Jan-Feb;24(1):59-66
pubmed: 12514084
Reprod Biomed Online. 2006 Apr;12(4):466-72
pubmed: 16740220