Validation of a competitive enzyme-linked immunosorbent assay to improve the serological diagnosis of swine vesicular disease.

Swine vesicular disease (SVD) is an infectious viral disease of pigs. The clinical symptoms of SVD are indistinguishable from other vesicular diseases. In countries free of vesicular diseases, rapid SVD diagnosis and differentiation from other vesicular diseases are essential. In this report, a competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) was developed and validated to improve the current SVD serological diagnosis. In this cELISA, an anti-SVD monoclonal antibody (mAb) captures the recombinant SVD virus-like particle (SVD-VLP) antigen, and 5B7 mAb is used as a competitor to compete with polyclonal antibodies in SVD-positive sera. The cut-off value of the SVD-VLP based cELISA (SVD-VLP cELISA) is ≥ 65% inhibition (%). The determined diagnostic specificity was 99.2%. SVD-VLP cELISA successfully detected SVD antibodies in the sera of SVD-infected animals and produced a diagnostic sensitivity of 100%. A panel of SVD positive sere including outbreak samples ( La maladie vésiculeuse du porc (SVD) est une maladie virale infectieuse des porcs. Les symptômes cliniques de la SVD sont indiscernables des autres maladies vésiculaires. Dans les pays exempts de maladies vésiculaires, un diagnostic rapide de la SVD et une différenciation avec les autres maladies vésiculaires sont essentiels. Dans ce rapport, un test immuno-enzymatique compétitif (cELISA) a été développé et validé pour améliorer le diagnostic sérologique actuel de la SVD. Dans ce cELISA, un anticorps monoclonal anti-SVD (mAb) capture l’antigène recombinant de particules de type virus SVD (SVD-VLP), et le mAb 5B7 est utilisé comme compétiteur pour concurrencer les anticorps polyclonaux dans les sérums positifs pour la SVD. La valeur seuil du cELISA basé sur SVD-VLP (cELISA SVD-VLP) est ≥ 65 % d’inhibition (%). La spécificité diagnostique déterminée était de 99,2 %. SVD-VLP cELISA a détecté avec succès des anticorps SVD dans les sérums d’animaux infectés par SVD et a produit une sensibilité diagnostique de 100 %. Un panel de sérums positifs pour la SVD, comprenant des échantillons d’épidémie (n = 11) et des échantillons (n = 5) de porcs inoculés expérimentalement, a été correctement identifié comme positif par le cELISA SVD-VLP. En termes de réduction des faux positifs détectés par le cELISA actuellement utilisé (5B7 cELISA), les performances du cELISA SVD-VLP sont comparables au test de neutralisation du virus de référence.(Traduit par Docteur Serge Messier).

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